酶標板的使用注意事項你都了解了多少?
更新時(shí)間:2020-01-02瀏覽:9045次
現在實(shí)驗室所使用的酶標板大多都是用的可拆卸型的,這樣可以更加的方便試驗所需?,F在常用的基本都是96孔的酶標板,不同廠(chǎng)家做出來(lái)的酶標板雖然說(shuō)在整體上看是差不多的,但是在一些小的細節方面會(huì )做的不太一樣,比如一些結構等方面,這主要是因為要配合不同酶標儀。那么酶標板怎么用呢?在使用的時(shí)候要注意什么?
酶標板的使用方式:
1、加樣品:將標本稀釋液加到包被板內,將需要檢測的血清用PBS或生理鹽水按照1:20的比例稀釋后取10ul加入到酶標板的反應孔內。
2、加對照:加入陰性對照3孔,陽(yáng)性對照1孔,還有100ul的對照血清。
3、進(jìn)行溫育:將反應板震蕩,使樣品充分的混勻,置于37℃的溫箱或者水浴反應20分鐘的時(shí)間。
4、洗板:用蒸餾水將洗滌液15ml稀釋至300ml的體積。手洗的時(shí)候應該將反應板孔內的容物傾出,將洗滌液注滿(mǎn)反應孔的位置,然后放置30秒鐘后用力甩去,這樣的動(dòng)作重復5次后開(kāi)始拍干。機洗需要進(jìn)行5次,每孔注入洗滌液200ul或者可以注滿(mǎn),然后停留30秒鐘后吸盡拍干。
5、加酶標工作液:在每孔內加入100ul的酶標工作液,放置到37℃的溫箱中,反應20分鐘后洗板5次,洗板的操作和上述步驟4是相同的。
6、這是反應的后一步,就是顯色和終止反應:將底物50ul加到反應孔內,37℃條件下避光顯色10分鐘的時(shí)間。在每孔內加入終止液50ul混勻用以終止反應。
酶標板的使用需要在無(wú)菌的條件下進(jìn)行。在酶標板使用之前和之后都要認真的進(jìn)行消毒和清洗,但是需要注意的是有的酶標板在消毒之前需要認真的閱讀說(shuō)明書(shū),看是否可以進(jìn)行高溫消毒。